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Kleinbölting, Nils: Charakterisierung und Sequenzanalyse von T-DNA Insertionsstrukturen und paralogen Bereichen im Genom von Arabidopsis thaliana basierend auf Optimierungen [...]. 2015
Inhalt
Zusammenfassung
Einführung
Modellorganismus Arabidopsis thaliana
Das Genom von A. thaliana
Genomevolution in A. thaliana
Reverse Genetik und die GABI-Kat-Kollektion
Transformation durch Agrobacterium tumefaciens
A. tumefaciens und das Ti-Plasmid
Der Weg der T-DNA in den Zellkern
Integration in das Genom
Ort der T-DNA Insertion
Reparaturmechanismen für Doppelstrangbrüche
Homologe Reparatur
Nicht-homologe Reparatur
Mikrohomologie-abhängige Reparatur
Die Insertionslinienpopulation GABI-Kat
Transformation in GABI-Kat
Insertionsstellen-Vorhersage
Der Bestätigungs-Prozess (Confirmation)
GABI-Kat LIMS und SimpleSearch
Andere Kollektionen
Zielsetzung
Ergebnisse
Optimierung der Insertionsstellen-Vorhersage und des Umgangs mit Kontaminationen
Berechnung von Gruppen paraloger Gene für die Erzeugung von Doppelmutanten in A. thaliana und deren Bereitstellung
Entwicklung eines Primerdesigns optimiert für paraloge Bereiche des Genoms von A. thaliana
Bioinformatische Analyse von Confirmation-Sequenzen in Bezug auf Merkmale des Integrationsmechanismus
Untersuchung von Border-Schnittstellen
Untersuchung von Mikrohomologien und Fillern
Analyse der Filler
Analyse von Deletionen und Duplikationen an der Insertionsstelle
Größere Deletionen und Inversionen
Vergleich mit Daten von SALK-Linien
Zusammenfassende Diskussion
Literaturverzeichnis
Abkürzungsverzeichnis
Publikation 1: GABI-Kat SimpleSearch: New features of the Arabidopsis thaliana T-DNA mutant database
Publikation 2: GABI-DUPLO: a collection of double mutants to overcome genetic redundancy in Arabidopsis thaliana
Publikation 3: An easy-to-use primer design tool to address paralogous loci and T-DNA insertion sites in the genome of Arabidopsis thaliana
Publikation 4: Evaluation of the structural features of thousands of T-DNA insertion sites indicates a double-strand break repair based insertion mechanism