TY  - THES
AB  - Die Generierung Antigen-spezifischer B-Lymphozyten ist essentiell für die humorale Immunantwort. Die Aktivierung von B-Zellen ist von Signalen abhängig, die über den B-Zell-Antigenrezeptor (BCR) vermittelt werden. Cytoplasmatische Protein-Tyrosinkinasen (PTKs) sind BCR-proximale Effektorproteine, die cytoplasmatische und transmembrane Adapterproteine wie SLP-65 oder NTAL phosphorylieren. Phosphoryliertes SLP-65 bildet das Gerüst für die Assemblierung und Aktivierung eines Proteinkomplexes, der die Ca2+-Freisetzung aus intrazellulären Speichern initiiert. Dieser Ca2+-Initiationskomplex besteht mindestens aus Brutons Tyrosinkinase (Btk) und Phospholipase C-[gamma]2 (PLC-[gamma]2). Die BCR-induzierte Ca2+-Mobilisierung beinhaltet sowohl die Freisetzung aus intrazellulären Ca2+-Speichern als auch den Einstrom über die Plasmamembran. Das Ausmaß der Ca2+-Mobilisierung aus diesen beiden Speichern hängt von dem Entwicklungsstadium des B-Lymphozyten ab. Die räumliche und zeitliche Veränderung von Ca2+-Profilen kann zu verschiedenen B-Zell-Antworten führen, d.h. Proliferation, Differenzierung, Anergie oder Apoptose. Gegenwärtig sind zentrale Fragen in der BCR-induzierten Ca2+-Mobilisierung: (1) wie wird der Ca2+-Initiationskomplex an die Membran rekrutiert, (2) was ist der exakte Mechanismus der BCR-vermittelten PLC-[gamma]2 Aktivierung, (3) wie ist die intrazelluläre Ca2+-Freisetzung mit dem Ca2+-Einstrom über die Plasmamembran verbunden, und (4) wie erfolgt die differentielle Regulierung der Ca2+-Mobilisierung während der B-Zell-Lymphopoese? In dieser Studie wurden diese Fragen mittels zielgerichteter Gen-Inaktivierung und nachfolgenden Rekonstitutionen analysiert. Es konnte gezeigt werden, dass der SH2/SH3-Adapter Grb2 die Ca2+-Mobilisierung aus intra- und extrazellulären Quellen negativ reguliert. Diese Funktion ist von der zentralen SH2- und der C-terminalen SH3-Domäne abhängig. Tyrosin-phosphoryliertes NTAL wirkt dieser Funktion durch die Grb2-Rekrutierung in lipid rafts entgegen. Es konnte des weiteren gezeigt werden, dass das NTAL/Grb2-Modul nicht den Phosphorylierungsgrad der zentralen Komponenten des Ca2+-Initiationskomplexes, d.h. SLP-65 oder PLC-[gamma]2, beeinflusst. Allerdings scheinen NTAL/Grb2 die PLC-[gamma]2-Aktivierung und/oder dessen Retention an der Plasmamembran zu kontrollieren. Es konnte im Rahmen dieser Arbeit herausgefunden werden, dass das Hauptphosphoprotein in DT40 das Grb2-Effektorprotein ist. Nachfolgend wurde dieses als das cytosolische Adapterprotein Dok-3 identifiziert. Die Phosphorylierung von Dok-3 durch Lyn ist abhängig von Grb2 und benötigt dessen zentrale SH2- und die C-terminale SH3-Domäne. Zusammenfassend deuten diese Studien darauf hin, dass Grb2 ein molekularer Schalter in der BCR-induzierten Ca2+-Mobilisierung ist. Die SH2-Domänen-abhängige Bindung von Grb2 an entweder Tyrosin-phosphoryliertes NTAL oder Dok-3 führt letztendlich zur positiven bzw. negativen Modulation der Antigenrezeptor-induzierten Ca2+-Mobilisierung in B-Zellen. In dieser Studie wurde ein neuer Ca2+-Regulationsmechanismus identifiziert. Die Adapter-vermittelte Modulation der Ca2+-Mobilisierung könnte durch die Unterstützung von entweder Aktivierung oder Toleranzinduktion die B-Zell-Signaltransduktion kritisch beeinflussen.
DA  - 2006
KW  - Calcium , Adapter , Anergie (Immunologie) , B-Lymphozyten-Rezeptor , Lymphozyt , Signaltransduktion , Phospholipase C , Plasmamembran , B-Zellen , Grb2 (Growth factor receptor-bound protein 2) , Dok3 (Downstream of tyrosine kinase 3) , B cells , Adaptor
LA  - eng
PY  - 2006
TI  - A molecular basis for differential Ca2+ signalling in B lymphocytes
UR  - https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:hbz:361-9917
Y2  - 2024-11-22T06:01:39
ER  -