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Postert, Christiane: Vergleich der Aktivierung von Signalkaskaden und Genen durch Oncostatin M in humanen Glioblastomzellen. 2004
Inhalt
Inhaltsverzeichnis
Abkürzungsverzeichnis
Einleitung
Oncostatin M (OSM) und Leukemia Inhibitory Factor (LIF)
Die Rezeptoren
Die intrazellulären Signalkaskaden
Die Jak (Janus-Kinasen)/Stat (Signal Transducers and Activators of Transcription)-Signalkaskade
Die MAPK (Mitogen-Activated Protein Kinase) -Signalkaskade
Gliome
Klassifikation der World Health Organisation (WHO)
Prognose
Therapeutische Ansätze
Zielsetzung
Material und Methoden
Chemikalien
Antikörper
Enzyme
Primer
Puffer
Medien
Zellinien
Oligonukleotide
Molekulargenetische Methoden
Isolation von RNA aus Zellen
Quantifizierung von RNA
cDNA-Synthese
Polymerase-Ketten Reaktion (PCR)
Gelelektrophorese von DNA
Radioaktive Markierung von Oligonukleotiden
Analyse von Proteinen
Anfertigung von Gesamtzell-Lysaten
Immunopräzipitation
Bestimmung der Proteinkonzentration
SDS-Polyacrylamidelektrophorese
Western Blot
Detektion mit dem ECL-Verfahren
Entfernen der Antikörper von PVDF-Membranen
Kernextraktion
Elektrophoretischer Mobilitätsshift-Assay \(EMS
Gel Supershift Assay
Native Tris/Glycin-Acrylamidelektrophorese
Autoradiographie
Zellkultur
Kultivierung der Zellen
Teilen der Zellen
Einfrieren der Zellen
Auftauen der Zellen
Bestimmung der Zellproliferation
BrdU-Test
Ergebnisse
Expression der Rezeptorkomponenten gp130, OSMR( und LIFR( in den Gliomzellinien
Effekt von OSM auf die Proliferation der Gliomzellen
Analyse der Tyrosinphosphorylierung durch OSM und LIF in Zell-Lysaten
Tyrosinphosphorylierung in Abhängigkeit von der
Tyrosinphosphorylierung in Abhängigkeit vom Zyto
Tyrosinphosphorylierung in Abhängigkeit von der
Identifizierung des 42 kD-Proteins
Aktivierung der Rezeptorkomponente gp130
Aktivierung der Signalkaskaden
Die Jak/Stat-Signalkaskade
Aktivierung der Janus-Kinasen
Aktivierung der Stat-Proteine
Die MAPK-Signalkaskade
DNA-Bindung der aktivierten Signalmoleküle
Bindung an das Oligonukleotid SIE
Ergebnisse des Elektrophoretischen Mobilitätsshi
Ergebnisse des Gel Supershift Assays
Bindung an das Oligonukleotid Stat5
Ergebnisse des Elektrophoretischen Mobilitätsshi
Ergebnisse des Gel Supershift Assays
Diskussion
Die Expression der OSM-Rezeptoren in den Gliomzellinien
OSM hemmt die Proliferationsrate von GOS 3 über
OSM erreicht in vielen verschiedenen Zellinien tr
Aktivierung der Jak/Stat- und der MAPK-Signalkask
DNA-Bindung von Stat-Proteinen nach OSM-Behandlung
Die Bedeutung der Zellinie A 1722
Schlussfolgerung
5. Literaturverzeichnis
Schulbildung
Tätigkeiten vor dem Studium
Studium