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Rogge, Phillip: Akute und postkonditionelle Effekte von Hypoxie, Azidose und Temperatur auf die Endothelzellfunktion. 8.11.2013
Inhalt
Einleitung
Die Rolle von Endothelzellen, Weibel-Palade-Körperchen und von-Willebrand-Faktor im Organismus
Rahmenbedingungen in Physiologie und Pathophysiologie, Vorarbeiten
Temperatur
Sauerstoffpartialdruck (pO2)
Kohlendioxidpartialdruck (pCO2) und pH-Wert
Problementwicklung
Temperatur
Einfluss des pH-Wertes auf die akute Hypoxie-Reaktion
Nachwirkungen einer stattgehabten Hypoxie, Azidose und Azidose-Hypoxie-Kombination
Gewinnung der Zellen aus Nabelschnüren
Kultivierung der Zellen
vWF-ELISA
Verwendete Materialien, Medien und Lösungen
Vorbereitung und Durchführung des vWF-ELISA
Rasterkraftmikroskopie
Verwendete Materialien, Medien und Lösungen
Zellvolumenbestimmung mittels Rasterkraftmikroskopie
Gedockte Vesikel und Fusionsporen in der Rasterkraftmikroskopie
Indirekte Immunfluoreszenzmikroskopie
Verwendete Materialien, Medien und Lösungen
Hypoxie-Applikation / Einstellung des Sauerstoffpartialdruckes
Versuchsablauf bei Hypoxie-Experimenten
Temperaturkontrolle und Temperatureinfluss
Messungen zur Temperaturstabilität der Inkubationskammer
Messungen zum Temperatureinfluss auf die vWF-Exozytose
Optimierung der Temperaturregulierung
Konstruktion einer Zellkulturplatten-Temperierung und Idee eines Mini-Inkubationssystemes für die Kavitäten der Zellkulturplatten
Mediumtemperierung und Äquilibrierung
Voruntersuchungen zur Gastemperierung und Anfeuchtung
Optimierung der Gastemperierung
Anfeuchtung des Gases
Datenerfassung, Statistik und Texterstellung
Datenerfassung und -bearbeitung
Statistik
Texterstellung
Ergebnisse
Temperaturstabilität der vorhanden Hypoxiekammer
Temperatureinflüsse auf die vWF-Freisetzung
vWF-Freisetzung in das Medium
Temperatureinfluss auf die Bildung von vWF-Fäden
Einflüsse einer Azidose auf die Hypoxiereaktion
Nachwirkungen von Hypoxie, Azidose und einer Azidose-Hypoxie-Kombination
vWF-Sekretion nach Hypoxie
vWF-Sekretion nach Azidose
vWF-Sekretion nach Azidose-Hypoxie-Kombination
Rasterkraftmikroskopische Aufnahmen nach Hypoxie
Diskussion
Temperatur und Temperaturstabilität
Diskussion der Daten im Kontext der Literatur
Konsequenzen für die Laborarbeit
Klinische Implikationen
Auswirkung der Azidose auf die akute Hypoxie-Wirkung
Diskussion der Daten im Kontext der Literatur
Klinische Implikationen
Nachwirkung einer stattgehabten Hypoxie bzw. azid. Hypoxie
Diskussion der Daten im Kontext der Literatur
Klinische Implikationen
Allgemeine Betrachtung der Ergebnisse im Gesamtkontext und Bezug zur aktuellen Forschung
Tabellenverzeichnis
Abbildungsverzeichnis
Literaturverzeichnis
Lebenslauf