Inhalt

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   ZUSAMMENFASSUNG
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   Inhaltsverzeichnis
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   1. Einleitung
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  Die vorliegende Arbeit soll die Signaltransduktion der CCK-i
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  1.1 Das Pankreas
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   1.1.1 Das exokrine Pankreas
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   1.1.2 Die Azinuszelle
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  1.2 Die exokrine Pankreassekretion
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   1.2.1 Cholecystokinin (CCK)
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   1.2.2 Cholezystokininrezeptoren
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   1.2.3 Die Mechanismen der Signaltransduktion
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  1.3 Die Pankreatitis
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   1.3.1 Die akute Pankreatitis
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   1.3.2 Pathogenese und Pathophysiologie der akuten Pankreatit
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   1.3.3 Die Rolle von Kalzium in der Pankreatitis
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   1.4 Bedeutung und Funktion von freien Radikalen
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   1.4.1 Herkunft von ROS in der Zelle
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   1.4.2 Zelluläre Reparaturmechanismen
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   1.4.3 Auswirkungen von oxidativem Stress auf das exokrine P
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   1.5 Zellkulturmodell
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  1.6 CCK-induzierte Signaltransduktion in AR42J-Zellen
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   Der partielle Agonist an CCK-Rezeptoren: JMV-180
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   1.6.2 EGF-Rezeptor-Tyrosinkinasen
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   1.6.3 G-Proteine
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   1.6.4 Phospholipase C
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  1.6.5 Proteinkinasen
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   1.6.5.1 SRC-Kinasen
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   1.6.5.2 Phosphatidyl-Inositol-3-Kinasen
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   1.6.5.3 MAP-Kinasen
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   1.6.5.4 Proteinkinase A
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   1.6.5.5 Proteinkinase C
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   Interaktionen zwischen NO-Radikalen und ROS
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   1.8 Aufgabenstellung
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  2. Materialien
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  2.1 Bezugsquellennachweis
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   2.1.1 Geräte und Software
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   2.1.2 Chemikalien
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   2.1.3 Inhibitoren
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   2.1.4 Donatoren
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   2.1.5 Fluoreszenzfarbstoffe
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  2.2 Medien und Puffer
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   2.2.1 Zellkulturmedien
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   2.2.2 Stammlösungen und Puffer
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  2.3 Zellinien und Antikörper
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   2.3.1 Zellinie
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   2.3.2 Antikörper
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  3. Methoden
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  3.1.1 Zellkultur
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   3.1.2 Kulturbedingungen
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   3.1.3 Einfrieren der Zellen
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   3.1.4 Auftauen der Zellen
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   3.1.5 Medienwechsel und Teilung der AR42J-Zellen
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   3.1.6 Aussäen auf 96-Loch-Platten
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   3.1.7 Differenzierung der Zellen
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  3.2 Quantifizierung der Radikalproduktion
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   3.2.1 Messung der Radikalentstehung nach Stimulation mit CCK
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   3.2.2 Messung der Radikalentstehung nach Stimulation mit CCK
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   3.3 Calciummessungen
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   3.4 NO-Messungen
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   3.5 Auswertung in SIGMAPLOT 4.0 2001
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  3.6 Immunhistochemische Detektion
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   3.6.1 Einzel-Immunomarkierung
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   3.6.2 Mikroskopie und Bildbearbeitung
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  Ergebnisse
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   Radikalentstehung nach Stimulation mit CCK bzw. Bombesin
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   4.2 Radikalentstehung nach Stimulation mit CCK bzw. Bombesin
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   4.3 Radikalentstehung in mit Dexamethason differenzierten AR
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   4.4 Oxidative DNA-Schädigung nach CCK-Stimulation
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   4.5 Der Radikalfänger N-Acetylcystein senkt die CCK-induzier
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  4.6 Signalwege der CCK-induzierten Radikalentstehung in AR42
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   JMV-180, ein partieller Agonist an CCK-Rezeptoren
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   4.6.2 CCK vermittelte, EGF induzierte Radikalentstehung in
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   Die Funktion von G-Proteinen bei der CCK-induzierten Radikal
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   Die Funktion der Phospholipase C in der CCK-induzierten Radi
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   Die Funktion von Tyrosinkinasen bei der CCK-induzierten Radi
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   stehung in AR42J-Zellen
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   Eine Kombination der Src-Kinasen-Inhibitoren PP-2 und Genist
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   Natriumazid führt nicht zu einer Senkung der CCK-induzierten
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   hung um 100%
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   4.6.7 Die Funktion von PI-3-Kinasen bei der Radikalentstehu
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   4.6.8 Die Funktion von MAPK-Kinasen bei der Radikalentstehu
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   Die Funktion von Proteinkinase A in der CCK-induzierten
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   Radikalenstehung in AR42J-Zellen
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   4.6.10 Die Funktion der Proteinkinase C in der CCK-induziert
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   4.7 Kalzium führt zur Freisetzung reaktiver Sauerstoff Spezi
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   4.8 Sauerstoffradikale führen nicht zum Ca2+-Einstrom in die
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   Der Ca2+-Chelator Bapta, AM führt unter Ausschaltung der
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   mitochondrialen Radikalproduktion zu einer Senkung der CCK-i
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   4.10 Interaktionen zwischen Stickoxid-Radikalen und Sauerst
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   4.10.1 Immunhiostochemische Darstellung von NOS I und NOS I
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   4.10.2 Nach Stimulation der AR42J-Zellen mit CCK und Wassers
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   4.10.3 NOS-Inhibitoren führen zu einem leichten Anstieg von
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   4.10.4 Der NOS-Donor SNAP führt in einer Messung mit DCF nic
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   4.10.5 Immunhistochemische Darstellung des Rückganges der DN
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   5. Diskussion
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   7. Literaturverzeichnis
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   8. Abkürzungen
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   9. Lebenslauf
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   10. Danksagung