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Nolting, Dorothea-Maria ; Kühn, Dorothea-Maria: Untersuchungen zur Zytotoxizität von Alkylanzien, Topoisomerasehemmstoffen und Ukrain auf vier humane Ewing-Sarkom-Zelllinien. 2005
Inhalt
1.1 Das Ewing-Sarkom
1.1.1 Definition und Ätiologie
1.1.2 Epidemiologie
1.1.3 Histologie und Molekulargenetik
1.1.4 Lokalisation und Metastasierung
1.1.5 Klinische Präsentation und Leitsymptome
1.1.6 Diagnostik
1.1.7 Stadieneinteilung
1.1.8 Therapie
1.1.9 Nachsorge und Spätfolgen
1.1.10 Prognose
1.2 Screeningprogramm des National Cancer Institute (NCI)
1.3 Eingesetzte Zytostatika
1.3.1 Alkylierende Verbindungen
1.3.1.1 Wirkmechanismus
1.3.1.2 Cyclophosphamid
1.3.1.2.1 Chemischer Aufbau
1.3.1.2.2 Anwendungsgebiete
1.3.1.2.3 Pharmakokinetik
1.3.1.2.4 Nebenwirkungen
1.3.1.3 ThioTEPA
1.3.1.3.1 Chemischer Aufbau
1.3.1.3.2 Anwendungsgebiete
1.3.1.3.3 Pharmakokinetik
1.3.1.3.4 Nebenwirkungen
1.3.2 Topoisomerasehemmer
Etoposid
1.3.2.1.1 Chemischer Aufbau
1.3.2.1.2 Wirkmechanismus
1.3.2.1.3 Anwendungsgebiete
1.3.2.1.4 Pharmakokinetik
1.3.2.1.5 Nebenwirkungen
1.3.2.2 Topotecan
1.3.2.2.1 Chemischer Aufbau
1.3.2.2.2 Wirkmechanismus
1.3.2.2.3 Anwendungsgebiete
1.3.2.2.4 Pharmakokinetik
1.3.2.2.5 Nebenwirkung
1.3.3 Ukrain und Chelidonium majus L.
1.3.3.1 Ukrain
1.3.3.1.1 Chemischer Aufbau
1.3.3.1.2 Wirkmechanismus
1.3.3.1.3 Anwendungsgebiete
1.3.3.1.4 Pharmakokinetik
1.3.3.1.5 Nebenwirkungen
1.3.3.1.6 Kritische Stimmen
1.3.3.2 Chelidonium majus L. (Schöllkraut, Papaveraceae)
1.3.3.2.1 Chemischer Aufbau
1.3.3.2.2 Wirkmechanismus
1.3.3.2.3 Anwendungsgebiete
1.3.3.2.4 Pharmakokinetik
1.3.3.2.5 Nebenwirkungen
1.4 Zielsetzung/Fragestellung
2 Material und Methoden
2.1 Material
2.1.1 Zelllinien
2.1.2 Zytostatika
2.1.3 Lösungen und Reagenzien
2.1.4 Einmal-Laborbedarf
2.1.5 Geräte
2.2 Methoden
2.2.1 Pflege der Zellkulturen
2.2.1.1 Das Einfrieren
2.2.1.2 Das Auftauen
2.2.1.3 Das Passagieren/Teilen
2.2.1.4 Das Aussiedeln
2.2.2 Durchführung der in-vitro-Toxizitätstests
2.2.2.1 Wachstumskurven
2.2.2.2 Testung der Lösungsmittel
2.2.2.3 Verdünnungsreihen der Prüfsubstanzen
2.2.2.4 Inkubation mit Zytostatikalösung
2.2.2.5 MTT-Assay
2.2.2.6 Kombinationsversuche
2.2.3 Datenauswertung
2.2.3.1 Ansatzgröße
2.2.3.2 Definition der GI50 und LC50
2.2.3.3 Graphische Darstellung der GI50
2.2.3.4 Berechnung der GI50/LC50
2.2.3.5 Reproduzierbarkeit
3 Ergebnisse
3.1 Ergebnisse der Wachstumskurven
3.2 Einfluss der Lösungsmittel
3.3 Ergebnisse der in-vitro-Toxizitätstests
3.3.1 Graphische Darstellung der Einzelsubstanzen
3.3.1.1 4-OOH-Cyclophosphamid
3.3.1.2 ThioTEPA
3.3.1.3 Etoposid
3.3.1.4 Topotecan
3.3.1.5 Ukrain
3.3.1.6 Chelidonium majus L. (Schöllkraut)
3.3.2 50 %-ige Wachstumshemmung (GI50)
3.3.2.1 Graphisch ermittelte GI50-Werte
3.3.2.2 Berechnung der GI50/LC50-Werte
3.3.3 Zusammenfassung und Vergleich der antiproliferativen Wirkung der Einzelsubstanzen
3.3.3.1 Alkylanzien
3.3.3.2 Topoisomerasehemmer
3.3.3.3 Ukrain, Chelidonium majus L. und ThioTEPA
3.3.4 Rangfolge der 6 Testsubstanzen
3.3.5 Chemosensitivität der Zelllinien
3.3.6 Graphische Darstellung der Kombinationsversuche
3.3.6.1 Koinkubation der Zelllinien mit 4-OOH-Cyclophosphamid/Etoposid
3.3.6.2 Koinkubation der Zelllinien mit 4-OOH-Cyclophosphamid/Topotecan
3.3.6.3 Koinkubation der Zelllinien mit Etoposid/Topotecan
3.3.6.4 Koinkubation der Zelllinien mit ThioTEPA/Chelidonium majus L.
3.3.7 Zusammenfassung und Vergleich der antiproliferativen Wirkung der Kombinationen
3.3.7.1 Berechnung der LC50-Werte
3.3.7.2 Cyclophosphamid/Etoposid versus Cyclophosphamid/Topotecan
3.3.7.3 Etoposid/Topotecan
3.3.7.4 ThioTEPA/Chelidonium majus L. versus Ukrain
4 Diskussion
4.1 In-vitro-Chemosensitivitätstestung
4.1.1 Bedeutung und Potential von Vorhersage-Assays
4.1.2 MTT-Assay im Vergleich
4.2 Zur Durchführung der in-vitro-Toxizitätstests
4.2.1 Inkubationszeit
4.2.2 Reproduzierbarkeit
4.3 Antiproliferative Wirkung der Testsubstanzen
4.3.1 4-OOH-Cyclophosphamid
4.3.2 ThioTEPA
4.3.3 Etoposid
4.3.4 Kombination 4-OOH-Cyclophosphamid/Etoposid
4.3.5 Topotecan
4.3.6 Kombination 4-OOH-Cyclophosphamid/Topotecan
4.3.7 Kombination Etoposid/Topotecan
4.3.8 Ukrain
4.3.9 Chelidonium majus L. (Schöllkraut)
4.3.10 Kombination ThioTEPA/Chelidonium majus L.
4.4 Einfluss von Resistenzmechanismen auf die Chemosensitivität der Zelllinien
5 Zusammenfassung
6 Literatur
7 Danksagung