TY - THES A3 - Kühn, Joachim AB - Wir untersuchten das Expressionsmuster eines Fusionsproteins aus gL und EGFP/ EYFP in Säugerzellen und das Verhalten bei der Virusreplikation. Mittels PCR wurde das aus dem Vektor pEUKT7C1gL amplifizierte gL-Gen in den Vektor pEGFPgDproT7 kloniert, später die EGFP -Sequenz gegen EYFP ausgetauscht. Die Expression erfolgte unter der Kontrolle des HSV-1 gD-Promotors. Nach der Infektion mit HSV-1 wiesen die Zellen eine ausgeprägte, überwiegend membranständige Autofluoreszenz auf. Es wurden Zelllinien, die das grün/ gelb fluoreszierende Fusionsprotein stabil unter der Kontrolle des viralen Promotors exprimierten, etabliert. Beide Fusionsproteine (ca. 65 kDA) konnten im Western-Blot mit EGFP–spezifischem Antiserum nachgewiesen werden. Es wurde gezeigt, dass das gL -Fusionsprotein in die Virushülle eingebaut wird. Die Hemmung der viralen DNA-Synthese durch Aciclovir bewirkte keine Minderung der gLEGFP-Expression. Das zeitliche Muster der Expression entsprach dem eines Early/Late-Proteins. AU - Krzemien, Eva Barbara AU - Krzemien, Eva DA - 2010 KW - Herpes simplex-Virus Typ-1 KW - gL KW - gH KW - Hüllglykoprotein KW - Fluoreszenzmikroskopie KW - Fusionsprotein KW - Green Fluorescent Protein LA - ger PY - 2010 TI - Herstellung und Charakterisierung von Fusionsproteinen aus Green Fluorescent Protein (GFP) und Glykoprotein L (gL) von Herpes simplex-Virus Typ 1 (HSV-1): Herstellung und Charakterisierung von Fusionsproteinen aus Green Fluorescent Protein (GFP) und Glykoprotein L (gL) von Herpes-simplex-Virus Typ 1 (HSV-1) UR - https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:hbz:6-16479602454 Y2 - 2024-11-24T12:20:48 ER -