TY - THES A3 - Weber, Wolf-Michael AB - Zur Etablierung eines rekombinanten phiC31-TAT-Systems für den nicht-viralen Gentransfer wurden verschiedene phiC31-Integrase-Konstrukte in E. coli BL21 Bakterien rekombinant exprimiert, chromatographisch aufgereinigt und sowohl im Reagenzglas als auch in renalen, alveolären und T-Zelllinien auf Funktionalität getestet. Zur Transduktion dieser Integrase-Plasmid-Komplexe in unterschiedliche Zelltypen wurden verschiedene Transduktionsmethoden verwendet. Stellvertretend für Lunge, Niere und Lymphozyten wurden A549-, 293- und Jurkat-T-Zellen mit Komplexen aus rekombinanter Integrase und einem Luziferase-attB-Plasmid behandelt und über einen Zeitraum von einem Monat auf Luziferaseexpression getestet. Der kombinierte phiC31-Integraseprotein-Plasmid-Transfer ist eine vielversprechende Anwendung für den nicht-viralen Gentransfer, was insbesondere durch die Vermittlung stabiler Langzeittransgenexpression in verschiedenen Zelltypen gezeigt werden konnte. AU - Bohla, Alexander DA - 2011 KW - phiC31 KW - Integrase KW - Gentransfer KW - nichtviral KW - Rekombinase KW - Expression LA - ger PY - 2011 TI - Untersuchungen kombinierter DNA-Protein-Transduktion zur Optimierung nicht-viralen Gentransfers UR - https://nbn-resolving.org/urn:nbn:de:hbz:6-54469533561 Y2 - 2024-11-22T03:36:10 ER -